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实验室该如何无菌采样?
文章作者:正维净化 时间:2020-11-19 08-55-21
(1) 液体样品液体样品比较容易获得,液态食品一般盛放在大罐中,取样时可连续或间歇搅拌。对于较小的容器,可在取样前将液体上下颠倒,使其完全混匀。取得的样品应放在已灭菌的容器中送往实验室,实验室在取样检测之前应当把液体再彻底混匀一次。固体样品固态样品常用的取样工具有解剖刀、勺子、软木钻、锯、钳子等,使用前均须灭菌。如奶粉等已经混匀的食品,其成分质量均匀稳定,可以抽取少量样品检测;散装样品要从多个点取样,且每个点都要单独处理,在检测前要彻底混匀;肉类、鱼类或类似食品既要在表皮取样,又要在深层取样,深层取样时要小心不要被表面污染。水样取水样时,最好选用带有防尘磨口瓶塞的广口瓶。如果样品时从水龙头上取得,龙头嘴的里外都应擦干净。打开水龙头让水流几分钟,关上水龙头并用酒精灯灼烧,再次打开水龙头让水流1-2min后再接样并装满取样瓶。如果检测的目的是用于追踪微生物的污染源建议还应在水龙头灭菌前取样会在龙头的里外用棉拭子涂抹取样,以检测水龙头自身污染的可能性。从水库、河流、井水等取水样时,用无菌的器械或工具拿取瓶子和打开瓶塞,在流动水中取样品是瓶嘴应直接对着水流。带包装食品直接食用的小包装食品尽可能取原包装,直到检测前不要开封防止污染;桶装或容器包装的液体或固体食品应用无菌取样器由几个不同部位采取,一起放入灭菌容器内;冷冻食品抽样之后送达实验室前,要始终保持样品处于冷冻状态。若样品一旦融化,不可使其再冷冻,保持冷却即可。无菌抽样的规范性是保证样品检测准确性的前提,因此我们在取样时应规范操作,确保从源头杜绝污染。
(2) 1、保证采样器具的无菌性
(1)玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌,保证恒温、时间足够(但不可时间过长,容易导致玻璃器皿易裂纹而报废)。 (2)取样筐:使用前要用75%酒精进行喷洒消毒。
(3)取样勺:要保证其清洁消毒,清洁后用75
%酒精进行擦拭消毒。
(4)取样袋:可先用酒精进行擦拭消毒,再在超净台用紫外灯照射消毒,(包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒)。 (5)电子称表面用 75%酒精消毒。
2、人员操作
(1)保证手部的清洗、消毒:取样前及检测前都要先洗手再消毒。
(2)取样要具有代表性(随机样、目的样、综合样)且要标示清楚。
(3)取样完毕,不可在车间逗留,要及时将样品放入超净台,对其外表面进行紫外灯照射消毒。(4)在要求的检测区域进行操作。
(5)检测前,要用 75%酒精棉球对样品袋口部进行擦拭消毒,再开口。
(6)往盐水瓶加样品时,要注意勺子或袋子尽量不接触瓶口。
(7)样品计量要准确,稀释倍数也要准确(1mL 吸管不允许将管口敲掉),进行 100 倍稀释时,1mL 吸管要伸入盐水中,不可以将样品从管壁流下去,同时要避免将管底部捅破。
(8)盐水温度以 40℃左右为宜,不能过热,会将部分微生物烫死;也不能温度太低,不能将样品溶解完全。
(9)进行稀释时,要摇匀,保证溶液的均一性。
(10)倾倒平皿时,要注意培养基瓶口不要接触到平皿;倾倒的培养基要适量,不可以太少,在培养过程中易干掉,微生物亦死亡,以 15mL 左右为宜。
(11)做大肠菌群样时,要提前将乳糖胆盐培养基培养管按需要量备好,放入超净台对外表面进行紫外线灭菌。
(12)接二步时,要注意先将接种针(环)进行冷却,避免出现接不上菌落的情况,导致无法判断、确认。
(13)检测完毕,及时放入相应培养箱进行培养,并清理清洁超净台。
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